川普5日在白宮東廳（East Room）簽署這項行政命令。白宮邀請數十名女學生、女性運動員和家長出席見證了簽署儀式。
行政命令指示，禁止美國國內生理男性的跨性別選手參加女性運動比賽；川普說：「我們不會再允許男人霸凌、傷害和欺騙女性；從今後，女子體育將只屬於女性」，「對女子體育的戰爭結束了。」
川普說，凡美國人民納稅錢補助的學校，若允許生理男性參加女子運動隊伍或進入更衣室，不遵守這項政策的，將被視為違反「1972年教育法修正案」第9條（Title IX），而失去取得聯邦資金的資格。
川普表示，這項行政命令將有效終結所有在公立中小學、大學等對女性運動選手的欺侮。
川普指出，跨性別選手已經偷走女性運動中3500個勝利，入侵逾11000場女性比賽，包括去年的亞利桑納州單車越野賽（Arizona trail race），以及2023年的女子健力比賽等。
川普認為，極左派近年來不斷推動取消生理性別，並用跨性別的意識形態來取代兩性，是共和黨去年贏得大選的關鍵之一。
川普今天稱這項進展「拿回我們的文化和法律」，是對「極端左派」反對生物學現實運動的反擊，他的政府在這方面會有一系列的行動。
川普也提及去年的巴黎奧運會，義大利女拳手卡里尼（Angela Carini）對上被質疑的變性拳手克利芙，卡里尼在比賽46秒後即棄賽；川普指，這是男性拳手偷走女性拳手的金牌。
針對2028年將在洛杉磯舉行的夏季奧運會，川普指出，他已要求國務卿盧比歐（Marco Rubio）告訴國際奧會（IOC），美國堅拒跨性別的荒謬現象（transgender lunacy）。
此行政命令無法影響到國際奧會，但川普說：「在2028年的洛杉磯奧運，美國不會坐視男性擊敗並傷害女性運動員。」
白宮發言人萊威特（Karoline Leavitt）在例行記者會也說，川普「希望」美國國家大學體育協會（NCAA）、國際奧會都不再允許跨性別者參加女子體育賽事。她說，川普的行政命令也會帶動大眾對這些組織施壓。
川普並指出，他已指示國務院、國土安全部，嚴格把關外國跨性別運動員的簽證申請，若他們要到美國參加女子體育賽事，美國拒絕發給他們簽證。
川普就任當天就發布一道全面性命令，要求聯邦政府對性別的定義只能有「男性」和「女性」這2種，也落實在護照等官方文件、聯邦監獄分配等政策。
華盛頓郵報（The Washington Post）報導，川普就任第8天，教育部宣布將對一所擁有「全性別廁所」（供多元性別使用的獨立廁所）的學校展開調查。川普也簽署行政命令，質疑跨性別女性不適合擔任軍人，並指示國防部檢討。
共和黨主導的眾議院上個月通過了一項法案，對未遵守運動員依生理性別參賽的學校，聯邦資金將被扣留，切實禁止跨性別者參加女子賽事。此項法案目前在等待參議院審議。
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